morris水迷宫（Morris水迷宫实验结果分析）

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1水迷宫时期

20世纪80年代初,英国的心理学家Morris和他的同事利用大鼠在盛有水和牛奶混合物的不透明水池中搜索目标物的方法,研究大鼠的海马等脑区受到损害后的学习记忆、空间定向以及认知能力时取得了令人瞩目的结果。

这种实验装置不但构思新颖、实验设计合理、方法简便实用,而且便于观察和记录动物入水后搜索藏在水下平台所需的时间、采用的策略和它们的游泳轨迹,从而可以分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。虽然起初的实验对象为大鼠，但此后该迷宫系统成为评估啮齿类动物空间学习和记忆能力的经典程序，被广泛应用于神经生物学、药理学等领域的基础和应用研究中。它能较客观地衡量动物空间记忆、工作记忆以及空间辨别能力的改变。因此,这种研究方法很快就引起各国神经科学家的关注,并将此法称为Morris水迷宫法。

之后，许多生物科技公司开始按照此原理设计和生产Morris水迷宫系统，国外有许多生产Morris水迷宫的公司，比如说德国的TSE公司，美国的Sandiegoinstruments公司、德国Biobserve公司等等；到了20世纪80年代末,中国科学院心理研究所建立了我国第一个Morris水迷宫实验室,并于90年代初建立了Morris水迷宫图像自动采集和处理系统。国内随后出现了许多Morris水迷宫生产厂家，做得比较好的厂家有上海欣软信息科技有限公司等等，但是从国际到国内，Morris水迷宫的硬件设备，软件系统，实验方法，以及实验数据的处理方法都不尽相同，因此，从Morris水迷宫法的发明到现在已有20余年的历史了，但是具体的实验准则并没有得到很好的规定。

2Morris水迷宫的实验方法

（1）将动物（大鼠或小鼠）头朝池壁放入水中，放入位置随机取东、西、南、北四个起始位置之一。记录动物找到水下平台的时间（s）。在前几次训练中，如果这个时间超过60s，则引导动物到平台。让动物在平台上停留10s.

（2）将动物移开、擦干。必要时将动物（尤其是大鼠）放在150W的白炽灯下烤5min，放回笼内。每只动物每天训练4次，两次训练之间间隔15~20min,连续训练5天。

（3）最后一次获得性训练结束后的第二天，将平台撤除，开始60s的探查训练。将动物由原先平台象限的对侧放入水中。记录动物在目标象限（原先放置平台的象限）所花的时间和进入该象限的次数，以此作为空间记忆的检测指标.

（4）测定动物的工作记忆（working memory）。探查训练结束后的第二天，开始维持4天的对位训练。将平台放在原先平台所在象限的对侧象限，方法与获得性训练相同。每天训练4次。每次记录找到平台的时间和游泳距离以及游泳速度。

3水迷宫分析穿越平台的次数用什么工具

水迷宫分析穿越平台的次数用Morris工具

Morris水迷宫是一种能够实时和离线分析Morris水迷宫实验过程的图像跟踪分析系统。

Morris水迷宫以摄像机和电脑作为硬件基础，实验过程中不需要对实验动物作特殊标记。来自Coulbourn公司的水迷宫系统是由制造商与Richard Morris (Edinborough大学)博士合作开发的，

因此这套系统是与实验紧密结合的，它已经被广泛的应用于学术界和工业界的优良实验室，并且逐渐成为行业标准。

4有头吴脑说行为：不同药剂对小鼠Morris水迷宫实验的影响

1材料和方法

1.1实验动物

健康雄性昆明种小鼠70只，体质量(25±2)g。所有小鼠先在实验室适应2d，确定其活动、进食均无异常后用于实验

1.2试剂与仪器:

氢溴酸东莨菪碱;亚硝酸钠;无水乙醇。Morris 水迷宫和visutrack动物行为分析软件（上海欣软）。

1.3 Morris水迷宫的方法

Morris水迷宫实验:30只小鼠按照随机数字表法随机分为三组，空白组10只，东莨菪碱组10只，乙醇组10只，Morris水迷宫实验包括定航实验和主动探索实验。前4d为定航实验，每天训练4次，每次从不同的入水点将小鼠面向池壁放入水池。水面高出平台1cm，水中加入适量墨汁，使小鼠看不到平台，温度维持在22～24℃。测试时间为90s，在平台上停留超过2s即为寻台成功。每次测试前小鼠在平台上有10s的前适应，测试完毕无论成功与否还有10s的后适应。小鼠从入水到寻台成功所需时间记作逃避潜伏期，寻台失败则逃避潜伏期记作90s，每一天训练4次结果的平均值作为当天训练的总结果。第5天为探索实验，撤去平台，选择平台所在象限对角象限作为入水点，记录90s内小鼠的穿台次数。

1.4Morris水迷宫实验模型建立

①记忆获得障碍模型在动物进行定航和主动探索实验之前15～20min，给动物腹腔注射氢溴酸东莨菪碱(胆碱能M受体拮抗剂，1mg/kg).②记忆再现障碍模型于动物下次测试之前15min给小鼠灌服乙醇(35%，0.1mL/10g体质量)，15min后进行重测试。主要观察指标:避暗实验中的避暗潜伏期、避暗错误次数、小鼠将头部及前爪全部伸入洞口的次数(简称探头数);Morris水迷宫实验中的每次训练定位航行逃避潜伏期的时间和主动探索穿越平台的次数。

2 Morris水迷宫实验结果

2.1定位航行实验结果

由图3可知，与空白对照组比较，随着时间的延长，东莨菪碱模型组小鼠每日定航实验中逃避潜伏期均显著延长(P＜0.05或P＜0.01)，乙醇模型组小鼠逃避潜伏期也延长，但无明显差异。

由图4可知，东莨菪碱模型组小鼠每日定航实验中总路程仍明显增多(P＜0.05或P＜0.01)，乙醇模型组与空白组相比无明显差异。

2.2主动探索实验结果

训练结束后，第5d为主动探索实验，撤去平台，选择平台所在象限对角象限作为入水点，记录90s内大鼠的穿台次数。由图5可见，东莨菪碱模型组穿越平台的次数较空白组明显减少(P＜0.05)，具有统计学意义。乙醇模型组与空白对照组相比无明显变化。

3讨论

Morris水迷宫是一种经典的学习记忆功能评价方法，定航实验和探索实验分别反映了动物的空间学习能力和空间记忆能力。本实验的定位航行和主动探索实验结果显示:东莨菪碱小鼠模型组定位航行逃避潜伏期明显延长而主动探索穿越平台的次数明显减少(p＜0.01或p＜0.05)，乙醇模型组无明显差异(p＞0.05)。提示东莨菪碱能够造成空间学习记忆障碍模型，而乙醇组不能作为空间学习记忆障碍模型的造模药物。

综上所述，本文综合比较了三种不同药物建立的学习记忆障碍模型，对其形成记忆损伤的持续时间和用药剂量进行摸索和比较，成功建立了有效的小鼠学习记忆障碍模型，在恰当的时间进行药物干预，从而更好地评价改善学习记忆障碍新药的效果。

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