培养基灭菌（培养基灭菌后可以放多久）

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1培养基灭菌方法

培养基的灭菌方法 高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。

灼烧灭菌 将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌。此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌。

高压蒸汽灭菌法。高压蒸汽灭菌法是可杀灭包括芽胞在内的所有微生物的一种灭菌方法。高压蒸汽灭菌法是灭菌效果中最好的。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。

常压蒸汽灭菌法：物品在锅内以常压蒸汽进行灭菌。通常蒸汽温度为摄氏95～105度，因此灭菌的时间要求6～8小时才能达到效果。这种方法适合人力、燃料充足，未有能力购置高压蒸汽锅的地方使用。

B 压力蒸汽灭菌法：用于耐高温、耐高压、耐潮湿的物品，如各种器械，敷料，搪瓷类、玻璃制品、橡胶类、某些药品，溶液、细菌培养基等的灭菌。压力达103～137kPA、，温度达121～126℃，保持20～30分钟，可达到灭菌效果。

2培养基的灭菌流程

1、灼烧灭菌 将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌。此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌。

2、灭菌后的培养基空白培养灭菌后的培养基放于37℃培养箱中培养，经24h培养无菌生长，可保存备用；斜面培养基取出后，立即摆成斜面后空白培养；半固体的培养基垂直放置凝成半固体深层琼脂后，空白培养。

3、培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下，温度121℃时，灭菌15~30min即可。

4、培养基在配制过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，灭菌工作至少应在24小时内完成。一般可在0.105MPa压力、121℃温度下灭菌15 ~ 30分钟。

5、连消：将配制好的并经预热（60～75℃）的培养基用泵连续输入由直接蒸汽加热的加热塔，使其在短时间内达到灭菌温度（126～132℃）。

6、减少杂菌消耗培养基中的营养，而且有些杂菌会抑制目标菌的生长），一般灭完菌后将培养基放在30-37度的环境中培养一天，看其有没有长菌（液体看是否变浑浊，固体看是否长菌落），即知是否灭菌后为无菌。

3基础培养基和含血清的培养基如何进行消毒灭菌?

间歇灭菌法的操作：间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂 菌的营养体，然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时，使芽孢和孢子萌发成为营养体。这时再以100℃处理半小时，再 放置24小时。

含IAA或GA3的培养基应在1周内用完，其他培养基最多也不要超过1个月。

常压蒸汽灭菌法：物品在锅内以常压蒸汽进行灭菌。通常蒸汽温度为摄氏95～105度，因此灭菌的时间要求6～8小时才能达到效果。这种方法适合人力、燃料充足，未有能力购置高压蒸汽锅的地方使用。

灭菌后的培养基可以在培养室中预培养3天。如果没有污染，证明灭菌完成，可以使用。暂时不用的培养基最好保存在10℃下。含IAA或GA3的培养基应在一周内用完，其他培养基最多不超过一个月。

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